ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КАЛЬБИНДИНА В РАЗВИВАЮЩЕМСЯ МОЗЖЕЧКЕ КРЫСЫ
Аннотация
Введение. Кальбиндин – кальций-связывающий белок, поддерживающий кальциевый гомеостаз для нормального функционирования нейронов. Цель. Изучить распределение иммунореактивности кальбиндина-D28К (calbindin-D28k) в структурах развивающегося мозжечка крысы. Материал и методы. Исследование выполнено на 16 беспородных белых крысах разных возрастных групп: 2, 7, 15-суточные (ранний постнатальный период), 45-суточные (пубертатный период). Для исследования брали участки коры мозжечка и фиксировали в цинк-этанол-формальдегиде для иммуногистохимического исследования. На парафиновых срезах с помощью первичных поликлональных кроличьих антител определяли иммунореактивность кальбиндина-D28К. Результаты. В коре мозжечка иммунореактивность кальбиндина выявляется на вторые сутки после развития в перикарионах клеток Пуркинье, а к 15 суткам – в дендритах и не изменяется к 45 суткам. Во все сроки исследования в КП она выявлялась не только в цитоплазме, но и в их ядре. В зернистом слое иммунореактивность кальбиндина снижается у крыс в постнатальном онтогенезе, однако у взрослых крыс некоторая часть нейронов умеренно иммунопозитивны, среди них с 15 суток после рождения выявляются кальбиндин-иммунореактивные афферентные нервные волокна, идущие в белом веществе. Не выявлено существенных различий распределения кальбиндина между долями мозжечка разного филогенетического возраста. Выводы. Учитывая, что экспрессия сalbindin-D28k выявляется на протяжении всего периода развития клеток Пуркинье, а также его физиологическую роль в поддержании функции и гомеостаза кальция в них, сalbindin-D28k – ценный маркер для морфофункциональной характеристики КП в развивающемся и взрослом мозжечке крыс в норме и при патологии.
Литература
Brini M, Calì T, Ottolini D, Carafoli E. Neuronal calcium signaling: function and dysfunction. Cell Mol Life Sci. 2014;71(15):2787-2814. http://doi.org/10.1007/s00018-013-1550-7.
Tsai FC, Kuo GH, Chang SW, Tsai PJ. Ca2+ signaling in cytoskeletal reorganization, cell migration, and cancer metastasis. Biomed Res Int. 2015:409245. http://doi.org/10.1155/2015/409245.
Enderlin S, Norman AW, Celio MR. Ontogeny of the calcium binding protein calbindin D-28k in the rat nervous system. Anat Embryol (Berl). 1987;177(1):15-28. http://doi.org/10.1007/bf00325286.
Wassef M, Zanetta JP, Brehier A, Sotelo C. Transient biochemical compartmentalization of Purkinje cells during early cerebellar development. Dev Biol. 1985;111(1):129- 137. http://doi.org/10.1016/0012-1606(85)90441-5.
Amenta F, Cavalotta D, Del Valle ME, Mancini M, Sabbatini M, Torres JM, Vega JA. Calbindin D-28k immunoreactivity in the rat cerebellar cortex: age-related changes. Neurosci Lett. 1994;178(1):131-134. http://doi.org/10.1016/0304-3940(94)90307-7.
Barski JJ, Hartmann J, Rose CR, Hoebeek F, Mörl K, Noll-Hussong M, De Zeeuw CI, Konnerth A, Meyer M. Calbindin in cerebellar Purkinje cells is a critical determinant of the precision of motor coordination. J Neurosci. 2003;23(8):3469-3477. http://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.23-08-03469.2003.
Erekat NS. Cerebellar Purkinje cells die by apoptosis in the shaker mutant rat. Brain Res. 2017;1657:323-332. http://doi.org/10.1016/j.brainres.2016.12.025.
Flace P, Lorusso L, Laiso G, Rizzi A, Cagiano R, Nico B, Ribatti D, Ambrosi G, Benagiano V. Calbindin-D28K immunoreactivity in the human cerebellar cortex. Anat Rec (Hoboken). 2014;297(7):1306-1315. http://doi.org/10.1002/ar.22921.
Bastianelli E. Distribution of calcium-binding proteins in the cerebellum. Cerebellum. 2003;2(4):242-262. http://doi.org/10.1080/14734220310022289.
Scotti AL. Calbindin D28k in the olivocerebellar projection. A light and electron microscope study. J Anat. 1995;187(3):649-659.
